免疫抑制治疗的患者中评估t细胞功能,包括实体器官移植患者
评估患者疑似在细胞免疫损伤
评估患者的T细胞功能主要免疫缺陷,要么细胞(迪格奥尔格综合征,T-negative重度联合免疫缺陷症:SCID等)或结合T - b细胞免疫缺陷(T -和B-negative SCID, Wiskott奥尔德里奇综合症,共济失调毛细血管扩张,常见变量免疫缺陷,等等),T细胞功能受损
评估患者的t细胞功能的二级免疫缺陷,相关的疾病或医源性
评价复苏的t细胞功能和能力的骨髓移植后或造血干细胞移植
测试Id | 报告名称 | 可单独购买 | 总是表现 |
---|---|---|---|
MGSTM | 额外的流兴奋剂,LPMGF | 不,(仅法案) | 没有 |
确保最可靠的结果,如果不足外周血单核细胞从患者标本中分离出的样品由于低白细胞计数或标本体积,选择稀释或兴奋剂不得自由裁量权的实验室进行测试。
与一个兴奋剂测试总是被执行。当足够的标本都可以使用兴奋剂测试,第二个兴奋剂将评估在一个额外的费用。
流血细胞计数
植物凝集素(PHA)
胚芽生殖有丝分裂原
免疫能力
体外t细胞功能
淋巴细胞胚芽生殖有丝分裂原
淋巴细胞转化
有丝分裂原的研究
有丝分裂原
植物凝集素(PHA)
商陆(PWM)
PWM(美洲商陆)
确保最可靠的结果,如果不足外周血单核细胞从患者标本中分离出的样品由于低白细胞计数或标本体积,选择稀释或兴奋剂不得自由裁量权的实验室进行测试。
与一个兴奋剂测试总是被执行。当足够的标本都可以使用兴奋剂测试,第二个兴奋剂将评估在一个额外的费用。
世行肝素钠
在实验室标本必须收到工作日,周五4点。收集和包样品尽可能接近运输时间。只船标本在环境航运Box-Critical标本(T668)后,说明在盒子里。
建议收集的标本在24小时内到达。
标本在周末到达可能被取消。
1。需要收集的日期和时间。
2。订购需要医生的名字和电话号码。
供应:环境运输Box-Critical只标本(T668)
容器/管:绿色最高(肝素钠)
样品数量:20毫升
看到表信息推荐量基于绝对淋巴细胞计数
儿科体积:
< 3个月:1毫升
3-24个月:3毫升
25 months-18年:5毫升
收集产品说明:在原始管发送全血标本。不整除。
附加信息:连续监测,建议标本收集同时进行。
表。血容量的建议基于绝对淋巴细胞计数(ALC)
有丝分裂原只
|
|||
酒精度x 10 (9) / L
|
血容量最小的植物凝集素(PHA)
|
血容量最小PHA和商陆促分裂原(PWM)
|
血容量的全面分析
|
< 0.5 |
> 6.5毫升 |
> 8.5毫升
|
> 22毫升
|
0.5 - -1.0 |
6.5毫升 |
8。5毫升 |
22毫升 |
1.1 - -1.5 |
3.0毫升 |
4.0毫升 |
10毫升 |
1.6 - -2.0 |
2.0毫升 |
2。5毫升 |
7毫升 |
2.1 - -3.0 |
1.5毫升 |
2。0毫升 |
6毫升 |
3.1 - -4.0 |
1.0毫升 |
1。5毫升 |
4毫升 |
4.1 - -5.0 |
0.8毫升 |
1。0毫升 |
3毫升 |
> 5.0 |
0.5毫升 |
0.8毫升 |
2毫升 |
有丝分裂原和抗原
|
||
酒精度x 10 (9) / L
|
每个试验的血液体积最小
|
血容量的全面分析
|
< 0.5 |
> 28毫升
|
> 60毫升 |
0.5 - -1.0 |
28毫升
|
60毫升 |
1.1 - -1.5 |
12毫升 |
30.毫升 |
1.6 - -2.0 |
8。5毫升 |
20.毫升 |
2.1 - -3.0 |
6.5毫升 |
15毫升 |
3.1 - -4.0 |
4.5毫升 |
10毫升 |
4.1 - -5.0 |
3.5毫升 |
8毫升 |
> 5.0 |
2。5毫升 |
6毫升 |
看到标本要求
严重溶血 | 拒绝 |
总脂血 | 拒绝 |
标本类型 | 温度 | 时间 | 特种集装箱 |
---|---|---|---|
世行肝素钠 | 环境 | 48小时 | 绿色高层/玫瑰 |
免疫抑制治疗的患者中评估t细胞功能,包括实体器官移植患者
评估患者疑似在细胞免疫损伤
评估患者的T细胞功能主要免疫缺陷,要么细胞(迪格奥尔格综合征,T-negative重度联合免疫缺陷症:SCID等)或结合T - b细胞免疫缺陷(T -和B-negative SCID, Wiskott奥尔德里奇综合症,共济失调毛细血管扩张,常见变量免疫缺陷,等等),T细胞功能受损
评估患者的t细胞功能的二级免疫缺陷,相关的疾病或医源性
评价复苏的t细胞功能和能力的骨髓移植后或造血干细胞移植
确保最可靠的结果,如果不足外周血单核细胞从患者标本中分离出的样品由于低白细胞计数或标本体积,选择稀释或兴奋剂不得自由裁量权的实验室进行测试。
与一个兴奋剂测试总是被执行。当足够的标本都可以使用兴奋剂测试,第二个兴奋剂将评估在一个额外的费用。
确定t细胞功能受损的方法培养人外周血单核细胞(PBMC)在体外促有丝分裂的植物凝集素(有丝分裂原)等植物凝集素(PHA)和商陆促分裂原(PWM)诊断免疫学曲目多年的一部分。(1、2)的广泛使用的方法评估迄今为止,淋巴细胞增殖的测量(3)H-thymidine纳入增殖细胞的DNA。(3)的缺点H-thymidine淋巴细胞增殖的方法是:
1。技术是麻烦,因为要使用的放射性物质。
2。它不区分不同细胞群对刺激做出反应。
3所示。它不提供任何信息的贡献activation-induced细胞死亡,最终结果的解释。
进一步,淋巴细胞增殖下降可能是由于几个因素,包括总体降低T细胞增殖,或总淋巴细胞增殖明显降低由于T细胞淋巴细胞减少和PBMC池中T细胞中所占比例较小。这些可以区分胸苷吸收试验,但可以评估通过流式细胞术,它使用抗体识别特定的应答细胞群。细胞生存能力也可以测量在同一试验不需要额外的细胞操纵或标本。
促分裂原是非常强有力的刺激器的抗原特异性t细胞的激活和增殖独立。(3)已经表明,分裂素可以诱导t细胞增殖反应,即使他们不能充分反应抗原(生理)刺激。因此,异常t细胞对有丝分裂原的反应被认为是诊断上较不敏感,但更具体,测试异常t细胞功能。凝集素促分裂原已被证明的T细胞受体结合,这是通过其碳水化合物的糖基化的一部分,从而激活的T细胞。促有丝分裂的刺激被证明能增加细胞内钙(Ca(2 +))的T细胞,这对T细胞增殖是至关重要的。虽然PHA是一个强大的t细胞有丝分裂原,脉宽调制是一种弱t细胞有丝分裂原,但诱导b细胞活化和增殖。
本试验使用一种方法直接测量s阶段淋巴细胞通过点击化学扩散。在表达载体Click-iT-EdU化验,点击化学已经适应测量细胞增殖通过直接检测核苷酸结合。在化验,alkyne-modified核苷提供细胞生长媒体定义的一段,是包含在细胞。随后细胞固定,permeabilized和叠氮化反应与dye-labeled,由铜催化的。染料之间形成共价键结合核苷酸,然后荧光信号通过流式细胞仪测量。(4)特定的增殖细胞群可以可视化的特异性抗体。细胞活力、细胞凋亡和死亡也可以用流式细胞仪使用7-aminoactinomycin D (7-AAD)和膜联蛋白V。
Click-iT-EdU试验已经证明是一个可以接受的替代测量(3)H-thymidine测定淋巴细胞/ t细胞增殖。(5、6)
淋巴细胞绝对计数的子集,受到各种生物因素的影响,包括激素、环境、和温度。研究日(生理)淋巴细胞计数的变化显示了进步的CD4 T细胞计数增加一整天,而CD8 T细胞和CD19 + B细胞增加上午8点到中午,中午和下午之间没有改变。自然杀手细胞计数,另一方面,是不变的。昼夜循环t细胞数量的变化与血浆皮质醇浓度负相关。事实上,皮质醇和儿茶酚胺浓度分布和控制,因此,天真与效应CD4和CD8 T细胞的数量。人们普遍认为低CD4 t细胞计数是早上与晚上(7)相比,在夏季比冬季。(8)因此,这些数据表明,时间和一致性在采血的时机是至关重要的连续监测病人淋巴细胞的子集。
淋巴细胞的生存能力0天:> = 75.0%
植物凝集素的最大扩散% CD45: > = 49.9%
植物凝集素的最大扩散% CD3: > = 58.5%
最大的商陆促分裂原% CD45: > = 4.5%
最大的商陆促分裂原% CD3: > = 3.5%
最大的商陆促分裂原% CD19: > = 3.9%
不正常有丝分裂原刺激试验结果表明t细胞功能受损,如果t细胞计数正常或仅略有下降。如果有深刻的T细胞淋巴细胞减少,可能存在未被充分代表的稀释效应T细胞在外周血单核细胞群,可能导致降低T细胞增殖反应。然而,这不是一个重要的问题在流式细胞术测定自收购期间额外的细胞活动分析可以弥补人工增殖减少由于降低t细胞数量。
之间没有绝对的相关性t细胞体外增殖和临床上重要的免疫缺陷,无论是小学或中学,自激活t细胞增殖反应是必要的,但不充分,一个有效的免疫反应。因此,增生性对有丝分裂原的反应可以被视为一个更具体的,但不敏感,测试诊断感染的易感性。
没有一个实验室测试可以确定或定义自己受损的细胞免疫。
控制在这个实验室和临床实验室大部分是健康的成年人。因为这个测试是用于筛查和评估婴儿和儿童的细胞免疫功能障碍,这是合理的问题之间的可比性的增殖反应健康的婴儿,儿童和成年人。一项研究报道,最高的有丝分裂原的反应被认为新生儿随后下降到6个月的年龄和通过青春期持续下降一半的新生儿反应。(9)的内部评价43小儿与成人正常对照组标本(所有年龄的),只有21%和14%低于第十百分位的成年美洲商陆参考范围和植物凝集素,分别。评论将提供报告中记录儿童的比较结果与成人参考值范围和相关临床上下文适当解释。
未取得正式儿科参考价值,它仍然是一个可能性,婴儿和儿童的反应可以被低估。然而,产生的实际挑战儿科范围的测定需要比较数据与成人参考价值或控制。
淋巴细胞增殖反应促分裂原和抗原明显受到自采血时间。结果被证明是变量样本评估24 - 48小时后采血;因此,淋巴细胞增殖结果必须与应有的谨慎和解释结果应该与临床相关的上下文。
当解释结果时,注意,淋巴细胞增殖反应的范围中观察到健康、免疫主管个人很大。引用值(基于健康的捐赠者)提供将有助于确定病人的大小反应。
淋巴细胞增殖分裂素是已知的影响伴随使用类固醇,免疫抑制剂,包括环孢霉素、他克莫司(吸收FK506),骁悉(霉酚酸酯)、免疫调节药物、酒精、生理和社会压力。
标本24小时以上可能产生虚假的结果。
减少结果可以获得包含过多的中性粒细胞或不能存活的细胞标本。(10)
时机和一致性在采血的时机是至关重要的连续监测病人淋巴细胞的子集。看到临床信息。
1。杜邦公司B,好RA:淋巴细胞转换体外免疫缺陷疾病患者:用于诊断、组织相容性测试和监测治疗。出生缺陷源自汽车列车Ser。1975; 11:477 - 485
2。艾浩利石头KD,费尔德曼哈,豪氏威马C, C,铙钹HH, Bonilla FA:分析体外淋巴细胞增殖的细胞免疫缺陷的筛选工具。Immunol。2009年4月,131 (1):41-49。doi: 10.1016 / j.clim.2008.11.003
3所示。Lis H,沙龙N:凝集素:Carbohydrate-specific蛋白调节细胞识别。化学启1998年4月,98 (2):637 - 674。doi: 10.1021 / cr940413g
4所示。撒利族的一个Mitchison TJ: DNA合成的化学方法快速、敏感的检测体内。《美国国家科学院刊。2008年2月,105 (7):2415 - 2420。doi: 10.1073 / pnas.0712168105
5。于Y, Arora, Min W, Roifman厘米,Grunebaum E: EdU-Click流式细胞术测定代替3 h-thymidine测量人类和小鼠淋巴细胞的增殖。J过敏Immunol。2009年2月,123 (2):S87。doi: 10.1016 / j.jaci.2008.12.307
6。克拉克圣,卡尔德龙V,布拉德福德JA:点击化学在流式细胞术分析细胞增殖。咕咕叫Protoc Cytom。2017年10月,82:7.49.1-7.49.30。doi: 10.1002 / cpcy.24
7所示。马龙杰希姆斯TE,灰色的GC, et al:来源的变化重复辅助1-infected艾滋病患者淋巴细胞计数:淋巴细胞总数波动和昼夜循环是很重要的。J艾滋病。1990;(3):144 - 151
8。Paglieroni TG、荷兰PV: Circannual淋巴细胞亚群的变化,再现。输血。1994年6月,34 (6):512 - 516
9。希克斯MJ,琼斯JK,蒂斯AC,韦格尔KA, Minnich噢,与年龄相关的变化从出生到老年mitogen-induced淋巴细胞功能。是中国分册,1983年8月,80 (2):159 - 163。doi: 10.1093 / ajcp / 80.2.159
10。马弗莱彻,城市RG,就是为了D, et al:淋巴细胞增殖。:玫瑰NR, de Macario EC折叠JD, et al, eds。临床免疫学实验室手册。5。ASM出版社;1997:313 - 319
11。骑士V, Heimall JR,庄H, et al:工具包和框架,优化实验室评估患者怀疑原发性免疫缺陷。J过敏Immunol Pract。2021年9月,9 (9):3293 - 3307. - e6。doi: 10.1016 / j.jaip.2021.05.004
外周血单核细胞RPMI 1640中补充谷酰胺和5%人类AB血清如果孵化或刺激与不同浓度的商陆(PWM)和植物凝集素。每天实验正常控制包含在每一批患者样本作为内部控制。
孵化后,细胞增殖和评估沾以下标记:CD45 +淋巴细胞、CD3 + T细胞CD69 +激活细胞,CD19 + B细胞(PWM)。报告结果为可行的细胞百分比0天,以及总淋巴细胞的增殖细胞的百分比,T细胞和B细胞(PWM)。(未发表的梅奥法)
星期一到星期五
这个测试被开发使用一种分析物特定的试剂。其性能特征是由梅奥诊所的方式与CLIA要求一致。这个测试没有被清除或得到美国食品和药物管理局的批准。
86353年
86353(如果合适的话)
测试Id | 测试顺序的名字 | 订单LOINC价值 |
---|---|---|
LPMGF | 淋巴细胞增殖,有丝分裂原 | 69018 - 0 |
结果Id | 测试结果的名字 | 结果LOINC值
仅适用于测量结果表示在单位最初报告的执行实验室。并不适用于这些值转换为其他单位的测量结果。
|
---|---|---|
32318年 | 已在第0天淋巴 | 33193 - 4 |
32320年 | 马克斯Prolif PHA的% CD3 | 57741 - 1 |
32319年 | 马克斯Prolif PHA的% CD45 | 69038 - 8 |
32323年 | 马克斯Prolif % CD19的PWM | 69037 - 0 |
32322年 | 马克斯Prolif PWM的% CD3 | 69020 - 6 |
32321年 | 马克斯Prolif % CD45的PWM | 69019 - 8 |
32317年 | 解释 | 69052 - 9 |
32324年 | 有丝分裂原的评论 | 48767 - 8 |