协助在骨髓增殖性肿瘤红细胞增多之间的区别和其他继发性红细胞增多
| 测试Id | 报告名称 | 可单独购买 | 总是表现 |
|---|---|---|---|
| JAKXR | JAK2外显子12 - 15测序,反射 | 是的,(顺序JAKXB-blood或JAKXM-bone骨髓),比尔 | 没有 |
DNA和RNA都提取出来。该算法从一个高度敏感的dnaJAK2V617F测试通过等位基因特定的聚合酶链反应。如果JAK2V617F结果是消极或积极非常低(0.06% - -0.6%),JAK2外显子12 - 15桑格将存储的RNA样品进行测序。如果一个JAK2检测到V617F突变(> 0.6%),没有进一步的测试将被执行。
桑格测序覆盖JAK2外显子12通过第一外显子15的90%,跨区域包含基本上所有突变在骨髓增殖性肿瘤。有关更多信息,以下算法:
- - - - - -红细胞增多评估测试算法
- - - - - -骨髓增殖性肿瘤:诊断骨髓的评估方法
- - - - - -骨髓增殖性肿瘤:诊断外周血评价方法
Allele-Specific聚合酶链反应(AS-PCR)和桑格测序
JAK2 V617F
JAK2外显子12
真性红细胞增多
骨髓增殖性肿瘤(或然数)
DNA和RNA都提取出来。该算法从一个高度敏感的dnaJAK2V617F测试通过等位基因特定的聚合酶链反应。如果JAK2V617F结果是消极或积极非常低(0.06% - -0.6%),JAK2外显子12 - 15桑格将存储的RNA样品进行测序。如果一个JAK2检测到V617F突变(> 0.6%),没有进一步的测试将被执行。
桑格测序覆盖JAK2外显子12通过第一外显子15的90%,跨区域包含基本上所有突变在骨髓增殖性肿瘤。有关更多信息,以下算法:
- - - - - -红细胞增多评估测试算法
- - - - - -骨髓增殖性肿瘤:诊断骨髓的评估方法
- - - - - -骨髓增殖性肿瘤:诊断外周血评价方法
不同
样品必须在5天内到达(120小时)的集合。
1。相关的病史
2。临床或形态学的怀疑
3所示。收集日期
4所示。标本来源
| 问题ID | 描述 | 答案 |
|---|---|---|
| MP037 | 标本类型 |
提交以下标本:只有1
样品类型:血
容器/管:薰衣草(EDTA)或黄色大(ACD-B)
样品数量:10毫升
收集产品说明:
1。反几次混合血。
2。在原始管发送全血标本。不整除。
3所示。标签和血液标本。
样品类型:骨髓抽出物
容器/管:薰衣草(EDTA)或黄色大(ACD-B)
样品数量:4毫升
收集产品说明:
1。反几次混合血。
2。在原始管发送骨髓标本。不整除。
3所示。标签作为骨髓标本。
如果不订购电子,完成,打印和发送Hematopathology /细胞遗传学测试要求(T726)标本。
血:8毫升
骨髓:2毫升
| 严重溶血 | 拒绝 |
| 石蜡包埋骨髓送气音凝块或活检块 幻灯片 石蜡刨花 中等至严重凝结的 |
拒绝 |
| 标本类型 | 温度 | 时间 | 特种集装箱 |
|---|---|---|---|
| 不同 | 冷藏(首选) | 5天 | |
| 环境 | 5天 |
协助在骨髓增殖性肿瘤红细胞增多之间的区别和其他继发性红细胞增多
DNA和RNA都提取出来。该算法从一个高度敏感的dnaJAK2V617F测试通过等位基因特定的聚合酶链反应。如果JAK2V617F结果是消极或积极非常低(0.06% - -0.6%),JAK2外显子12 - 15桑格将存储的RNA样品进行测序。如果一个JAK2检测到V617F突变(> 0.6%),没有进一步的测试将被执行。
桑格测序覆盖JAK2外显子12通过第一外显子15的90%,跨区域包含基本上所有突变在骨髓增殖性肿瘤。有关更多信息,以下算法:
- - - - - -红细胞增多评估测试算法
- - - - - -骨髓增殖性肿瘤:诊断骨髓的评估方法
- - - - - -骨髓增殖性肿瘤:诊断外周血评价方法
Janus激酶2 (JAK2)基因编码的一种酪氨酸激酶(JAK2)与胞质部分相关联的各种跨膜细胞因子和生长因子受体重要的造血细胞的信号转导。信号通过JAK2下游信号传感器和催化剂的活化导致磷酸化蛋白质转录(STAT)(如STAT5)最终导致细胞生长和分化。的JAK2V617F突变位于外显子14和出现在50%到60%的原发性骨髓纤维化和必要的血小板增多,95%到98%的红细胞增多(PV)。在PV的其他情况下,o版本50个不同的突变的外显子12通过15内已报告JAK2,基本上所有的non-V617FJAK2在PV突变已确定。这些变异包括点改变和小插入或删除。几个外显子12突变已被证明有V617F突变引起的生物效应类似,目前认为其他nonpolymorphic突变也有类似的临床效果。然而,一些突变可能不是特点和需要进一步的临床和研究评估。
一个将提供解释报告
的结果将报告为1 3以下状态:
艾滋病患者的JAK2V617F突变
艾滋病患者的JAK2比V617F突变(其他)
消极的JAK2突变
如果结果是正的,变异的描述在核苷酸水平和改变的蛋白质序列。
积极的突变状态是高度提示骨髓肿瘤和可能支持在适当的临床诊断为真性红细胞增多。与临床病理的相关性的发现和其他实验室结果在所有情况下都是必要的。
负突变状态真性红细胞增多极不可能的诊断,尽管它并没有完全排除这种可能性,其他骨髓增殖性肿瘤或其他肿瘤。
一个积极的结果是不具体的特定诊断。与临床病理的相关性的发现和其他实验室结果在所有情况下都是必要的。
如果这个测试命令设置真性红细胞增多的红细胞增多和猜疑,解释之前需要与并发相关或最近的骨髓评估。
1。巴克斯特EJ,斯科特LM,坎贝尔PJ, et al:获得突变的酪氨酸激酶JAK2人类骨髓增生障碍。柳叶刀》。2005年3月,365 (9464):1054 - 1061。doi: 10.1016 / s0140 - 6736 (05) 71142 - 9
2。James C,尤格V, Le Couedic JP等:一个独特的克隆JAK2突变导致本构信号导致polycythaemia维拉。大自然。2005年4月,434 (7037):1144 - 1148。doi: 10.1038 / nature03546
3所示。Kralovics R,得到F,布塞尔,et al:功能获得突变JAK2在骨髓增殖性疾病。郑传经地中海J。2005年4月,352 (17):1779 - 1790。doi: 10.1056 / NEJMoa051113
4所示。斯丁斯默DP、Dewald GW Lasho TL, et al:JAK2V617F突变激活酪氨酸激酶是一种罕见的事件在两个“非典型”骨髓增生障碍和骨髓增生异常综合征。血。2005年8月,106 (4):1207 - 1209。doi: 10.1182 / - 2005 - 03 - 1183血
5。马W, Kantarjian H,张X, et al:突变的JAK2记录患者的慢性骨髓肿瘤。J摩尔成岩作用。2009年1月,11(1):调查
6。Kilpivaara O,莱文RL:JAK2和MPL在骨髓增殖性肿瘤突变:发现和科学。白血病。2008年10月,22 (10):1813 - 1817。doi: 10.1038 / leu.2008.229
7所示。Kravolics R:基因骨髓增殖性肿瘤的复杂性。白血病。2008年10月,22 (10):1841 - 1848。doi: 10.1038 / leu.2008.233
8。Defour JP, Chachoua我Pecquet C, Constantinescu SN: 17突变致癌的MPL /促血小板生成素受体激活W515:对骨髓增殖性肿瘤的影响。白血病。2016;30:1214 - 1216。doi: 10.1038 / leu.2015.271
基因组DNA提取,2聚合酶链反应(PCR)用于每个样本的反应。在每一个反应,短片段基因组DNA,包括JAK2V617网站,使用定量PCR放大实时PCR仪。第一反应,反向引物的5 '端基础相匹配JAK2V617F突变序列和PCR条件,它只会把DNA突变。在第二反应,5 '末端的反向引物与野生型序列匹配,和PCR条件,它只会将野生型序列。在这两种反应,PCR是使用TaqMan探针化学监测。突变的DNA和野生型DNA的数量为每个样品测量。在每次运行、突变的数量和野生型DNA还测量了校准器DNA样本。校准器是积极的细胞系的DNA的混合物和一个消极的细胞系并用于减轻运行的变化。每个反应后,相对量化软件用于计算归一化突变:野生型比率,表示为一个无单位的比例与校准器数据校正后。
归一化比率的公式如下:
归一化率=
|
突变/野生型(样本)
|
突变/野生型(仪)
|
最终结果报告为%JAK2V617F总额的JAK2(即,突变/突变+野生型x 100%)。(未发表的梅奥法)
桑格测序,总RNA从全血中提取或骨髓和互补DNA合成JAK2信使RNA。跨外显子片段然后放大使用标准的12到15 PCR和利用Sanger测序获得的序列分析自动基因分析仪。(未发表的梅奥法)
星期一到星期五
这个测试开发,其性能特征由梅奥诊所的方式与CLIA要求一致。这个测试没有被清除或得到美国食品和药物管理局的批准。
81270 - jak2 V617
0027 u(如果合适的话)
| 测试Id | 测试顺序的名字 | 订单LOINC价值 |
|---|---|---|
| PVJAK | 光伏(JAK2 V617F,外显子12 - 15)反射 | 过程中 |
| 结果Id | 测试结果的名字 | 结果LOINC值
仅适用于测量结果表示在单位最初报告的执行实验室。并不适用于这些值转换为其他单位的测量结果。
|
|---|---|---|
| MP037 | 标本类型 | 31208 - 2 |
| 42394年 | 最后的诊断 | 50398 - 7 |
| 42395年 | PV反射的结果 | 43399 - 5 |