分子检测耐药性变异的文化隔离结核分枝杆菌复杂的
可以提供更快速检测耐药表型,体贴的测试
协助解决的矛盾的结果使用表型检测方法米肺结核不充分可行的隔离,以便培养测试
全基因组测序(WGS)结核分枝杆菌执行复杂的隔离紧随其后评价选择感兴趣的基因特征明显,药物resistance-conferring变体。
传统的体贴,表型耐药测试也应该执行,因为并不是所有基因与内阻力有关米肺结核复杂的基因组已经被完全阐明或在这个测试评估。如果希望使用传统的体贴的表型耐药测试,添加TB1LN /抗菌药物敏感性,结核分枝杆菌复杂,第一行,各不相同;TB2LN /敏感性,结核分枝杆菌复杂,第二行,各不相同;和TBPZA /敏感性,结核分枝杆菌复杂,吡嗪酰胺,各不相同。
全基因组测序
接下来一代测序测试
结核分枝杆菌药敏试验
全基因组测序检测
全基因组测序(WGS)结核分枝杆菌执行复杂的隔离紧随其后评价选择感兴趣的基因特征明显,药物resistance-conferring变体。
传统的体贴,表型耐药测试也应该执行,因为并不是所有基因与内阻力有关米肺结核复杂的基因组已经被完全阐明或在这个测试评估。如果希望使用传统的体贴的表型耐药测试,添加TB1LN /抗菌药物敏感性,结核分枝杆菌复杂,第一行,各不相同;TB2LN /敏感性,结核分枝杆菌复杂,第二行,各不相同;和TBPZA /敏感性,结核分枝杆菌复杂,吡嗪酰胺,各不相同。
不同
如果希望使用传统的体贴的表型耐药测试,添加TB1LN /抗菌药物敏感性,结核分枝杆菌复杂,第一行,各不相同;TB2LN /敏感性,结核分枝杆菌复杂,第二行,各不相同;和TBPZA /敏感性,结核分枝杆菌复杂,吡嗪酰胺,各不相同。
看到传染性标本运输指南在特殊指令
1。标本来源是必需的。
2。生物识别是必需的;如果没有提供生物识别将反折的CTBID /文化被识别,分枝杆菌和诺卡氏菌属,随额外的费用。
3所示。识别法是必需的(如核酸杂交探针,matrix-assisted激光解吸/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS), DNA测序,线性探针测定)。
供应:传染性容器,大(T146)
样品类型:分枝杆菌肺结核复杂的隔离在纯培养。隔离5周以上或不是一个纯粹的文化可能需要亚文化对新鲜,孤立发展的周转时间的结果可能被推迟。
容器/管:麦德布鲁克(7 h10或7 h11)中等偏;增长的肉汤培养基(如分枝杆菌生长指示管[7 h9]汤)或Lowenstein-Jensen中等偏可以发送,但结果可能会被推迟,因为亚文化周转时间可能需要麦德布鲁克琼脂培养基。生物体在混合物可能会导致额外的费用隔离和标识。
样品数量:隔离与可见的增长在固体介质;如果送汤,3毫升以上的肉汤培养要求。
收集产品说明:
1。生物必须在纯培养,积极成长。不提交混合文化。
2。将标本放在一个大传染性容器和标签作为病原体/传染性物质。
如果不是电子订购,完成,打印和发送微生物测试请求(T244)标本。
琼脂板 混合的文化 |
拒绝 |
标本类型 | 温度 | 时间 | 特种集装箱 |
---|---|---|---|
不同 | 环境(首选) | ||
冷藏 |
分子检测耐药性变异的文化隔离结核分枝杆菌复杂的
可以提供更快速检测耐药表型,体贴的测试
协助解决的矛盾的结果使用表型检测方法米肺结核不充分可行的隔离,以便培养测试
全基因组测序(WGS)结核分枝杆菌执行复杂的隔离紧随其后评价选择感兴趣的基因特征明显,药物resistance-conferring变体。
传统的体贴,表型耐药测试也应该执行,因为并不是所有基因与内阻力有关米肺结核复杂的基因组已经被完全阐明或在这个测试评估。如果希望使用传统的体贴的表型耐药测试,添加TB1LN /抗菌药物敏感性,结核分枝杆菌复杂,第一行,各不相同;TB2LN /敏感性,结核分枝杆菌复杂,第二行,各不相同;和TBPZA /敏感性,结核分枝杆菌复杂,吡嗪酰胺,各不相同。
结核病患者疾病管理的一个重要组成部分的测试结核分枝杆菌复杂分离耐一线和二线antituberculous药物。表型基于细菌耐药性测试常常使用汤的方法,因为他们执行比例比对照的琼脂更快速的方法。然而,即使快速汤方法需要大约14天文化和身份的隔离M肺结核可以执行复杂的敏感性测试之前。
整个基因组测序(WGS)测试提供良好的分子检测耐药性变异米肺结核复杂的测序米肺结核隔离。它的目的是帮助一线和二线antituberculous阻力的检测代理包括异烟肼、利福平、乙胺丁醇、吡嗪酰胺、氟喹诺酮类原料药(莫西沙星和氧氟沙星)和氨基糖甙类链霉素、卡那霉素、阿米卡星)。这种测试评估选择感兴趣的基因包括:
药物/毒品类 |
基因 |
异烟肼 |
ahpC |
fabG1 |
|
韩国仁荷 |
|
katG |
|
利福平 |
rpoB |
乙胺丁醇 |
embB |
吡嗪酰胺 |
pncA |
氟喹诺酮类原料药 |
gyrA |
氨基糖甙类 |
eis |
gidB |
|
rpsL |
|
rrs |
检测结果报告为变体或未检测到变异。
查询基因的变异检测分枝杆菌肺结核复杂,高度与耐药相关报道随着频率的检测基因与表型相关验证的研究基于细菌耐药性全基因组测序方法。例如,检测的rpoBS450L变体将报告为“rpoBS450L”和评论将被包含在报告说“可能耐利福平;173年的一项研究,隔离,35/35(100%)的隔离带有这种变异基因对利福平耐药。”
如果没有检测到变异与耐药有关米肺结核复杂的分离,一个“不”变异检测结果报告连同的频率隔离在验证研究显示表型基于细菌耐药性评估基因的变体。例如,如果没有检测到的变体gyrA基因,该报告将显示“未检测到变异”和评论说“在173年的一项研究隔离,22/23(95.7%)的氟喹诺酮类耐药隔离有变体gyrA”。
基因变异的未知意义不报道。
梅奥诊所的基因变异数据库包含380多个高信任度变体在选定的基因中分枝杆菌肺结核复杂,与耐药性密切相关。可能还有其他查询基因的遗传变异,或额外的基因不检查,有一个未定义的关联与阻力米肺结核复杂。因此,传统的表型抗菌素耐药性测试需要补充基因型的测序结果。
缺乏一个基因变异分析并不表明,分离是容易的抗菌剂,因为并不是所有的基因米肺结核复杂的组合查询和因为基因变异的影响目前未知。
检测的变异并不意味着表型表达的基因可能不是阻力,可以用低水平表达,或者可能非功能。
1。Kozyreva VK、Truong氯Greninger,克兰德尔J, Mukhopadhyay R,查图尔维迪V:验证和实施临床实验室改进Act-Compliant全基因组测序的公共卫生微生物实验室。中国Microbiol。2017年8月,55 (8):2502 - 2520
2。谢伊J, Halse助教,拉皮埃尔P, et al:全面的全基因组测序和报告耐药性的临床病例资料结核分枝杆菌在纽约州。中国Microbiol。2017年6月,55岁(6):1871 - 1882
3所示。坎贝尔PJ,摩洛克医生,赛克斯RD, et al:分子检测与一线和二线药物耐药性相关的突变与常规药敏试验结核分枝杆菌。Antimicrob代理Chemother。2011年,55岁(5):2032 - 2041
结核分枝杆菌复杂的分离细胞溶解和基因组核酸纯化和量化。图书馆准备执行全基因组测序用纯化的50到100 ng米肺结核复杂的DNA和Illumina公司TruSeq Nano DNA库准备装备。图书馆准备后,样品测定的数量和汇集在一个多路复用的Illumina公司音序器,paired-end全基因组测序。获得的序列相比米肺结核参考基因组(应变H37Rv)来识别变异。变体评论和解释完成通过对比发现的任何变体与梅奥经验数据库和报告任何匹配的变体。至少40 x位置覆盖,覆盖20 x变体,15%的变异频率相比H37Rv需要参考基因组之前报告的一个变种。变异的未知意义不报道。(未发表的梅奥法)
星期二,星期四
这个测试开发,其性能特征由梅奥诊所的方式与CLIA要求一致。这个测试没有被清除或得到美国食品和药物管理局的批准。
81479年
测试Id | 测试顺序的名字 | 订单LOINC价值 |
---|---|---|
TBNGS | 结核分枝杆菌敏感性,复杂,上天 | 94053 - 6 |
结果Id | 测试结果的名字 | 结果LOINC值
仅适用于测量结果表示在单位最初报告的执行实验室。并不适用于这些值转换为其他单位的测量结果。
|
---|---|---|
TBOR | 生物识别 | 9825 - 1 |
脑外伤 | 文化隔离从标本来源 | 31208 - 2 |
602791年 | rpoB | 94065 - 0 |
603383年 | rpoB解释 | 89489 - 9 |
603384年 | katG | 94054 - 4 |
603385年 | katG解释 | 89488 - 1 |
603386年 | 韩国仁荷 | 94055 - 1 |
603387年 | 韩国仁荷解释 | 89488 - 1 |
603388年 | fabG1 | 94056 - 9 |
603389年 | fabG1解释 | 89488 - 1 |
603390年 | ahpC | 94057 - 7 |
603391年 | ahpC解释 | 89488 - 1 |
603392年 | embB | 94058 - 5 |
603393年 | embB解释 | 89491 - 5 |
603394年 | pncA | 94059 - 3 |
603395年 | pncA解释 | 92242 - 7 |
603396年 | gyrA | 94060 - 1 |
603397年 | gyrA解释 | 89487 - 3 |
603398年 | gidB | 94061 - 9 |
603399年 | gidB解释 | 89490 - 7 |
603400年 | rrs | 94062 - 7 |
603401年 | rrs解释 | 89490 - 7 |
603402年 | rpsL | 94063 - 5 |
603403年 | rpsL解释 | 89490 - 7 |
603404年 | eis | 94064 - 3 |
603405年 | eis解释 | 89490 - 7 |
603535年 | 方法 | 85069 - 3 |