测试Id:LPA3P

测试2兴奋剂总是被执行。当足够的标本是可用的,第三个兴奋剂会单独执行和宣传。如果孤立patienta€™s外周血单核细胞(PBMCs)白细胞很低,选择稀释或兴奋剂不得用于实验室的自由裁量权,以确保最可靠的结果。

在实验室标本需要收到工作日,周五4点。画和包样品尽可能接近运输时间。只船标本在环境航运Box-Critical标本(T668)后,说明在盒子里。

建议画的标本在24小时内到达。

样品到达在周末和观察到的假期可能被取消。

日期和时间的画和排序需要医生的名字和电话号码。

连续监测,我们建议标本画在同一时间执行。

1毫升

一个二级测试后淋巴细胞增殖分裂素(特别是植物凝集素)被评估。anti-CD3扩散面板不是一级测试评估淋巴细胞(t细胞)功能

测试2兴奋剂总是被执行。当足够的标本是可用的,第三个兴奋剂会单独执行和宣传。如果孤立patienta€™s外周血单核细胞(PBMCs)白细胞很低,选择稀释或兴奋剂不得用于实验室的自由裁量权,以确保最可靠的结果。

t细胞刺激体外诊断免疫学领域广泛用于促进t细胞增殖和评价t细胞功能的多种临床环境。(1、2)的广泛使用的方法评估淋巴细胞增殖的测量3 h-thymidine纳入增殖细胞的DNA。3 h-thymidine淋巴细胞增殖的方法的缺点是:1)技术是麻烦,因为要使用放射性物质;2)不允许歧视应对刺激的反应细胞群;3)它不提供任何信息在细胞凋亡的贡献或细胞死亡最终结果的解释。进一步,淋巴细胞增殖下降可能是由于几个因素,包括总体降低T细胞增殖,减少在只有一个子集的T细胞增殖,或总淋巴细胞增殖明显降低由于T细胞淋巴细胞减少和代表名额不足的T细胞在外周血单核细胞池中。这些可以歧视胸苷吸收试验,但可以通过流式细胞术评估使用抗体识别特定的应答细胞群。细胞生存能力也可以测量在同一试验不需要额外的细胞操纵或样本。

而有丝分裂原,如植物凝集素(PHA)激活T细胞通过绑定细胞膜糖蛋白,包括T细胞受体(TCR) CD3复杂,有大量的促有丝分裂的或comitogenic抗体,包括那些针对CD3 coreceptor能够刺激T细胞增殖。通常,anti-CD3抗体提供了一个初始激活信号,但不引起显著的增殖,并添加costimulatory抗体(anti-CD28)提供了强大的刺激增殖。(3)外生t细胞生长因子,如白介素2(2),也可以使用另一种anti-CD28聚集有关,患者和疑似receptor-associated - 2信号缺陷,它可能比使用anti-CD28更有帮助。2,一个自分泌细胞因子,已经证明在T细胞增殖至关重要。(4、5)与2 - 2受体之间的相互作用(IL-2R)中起着重要的作用调节T细胞增殖。(4)触发识别导致合成的在某些- 2 T细胞和抗原诱导的高亲和性IL-2Rs子集或T细胞增殖作用,和绑定2 IL-2R最终导致T细胞增殖。使用外源性- 2与anti-CD3 T细胞是否允许歧视,不能扩散到其他促有丝分裂的信号,可以应对强大的生长因子- 2等。刺激T细胞和可溶性抗体anti-CD3(和相关的细胞复杂)导致动员细胞质钙和易位的蛋白激酶C细胞质和细胞膜。这种刺激也会引起感应的磷脂酰肌醇代谢和后续生产扩散- 2。(6)t细胞激活anti-CD3抗体需要长时间的刺激诱导的蛋白激酶C,这显然可以通过同时使用anti-CD28抗体聚集有关,没有添加其他促有丝分裂的刺激,如十四烷酸佛波醇酯(PMA)。(7)

本试验使用一种方法直接测量s阶段淋巴细胞通过点击化学扩散。在表达载体Click-iT-EdU化验,点击化学已经适应测量细胞增殖通过直接检测核苷酸结合。Click-iT-EdU试验已被证明是一个可以接受的替代测量3 h-thymidine测定淋巴细胞/ t细胞增殖。(8)

在化验,alkyne-modified核苷提供细胞生长媒体定义的时间段,是包含在细胞。随后细胞固定,permeabilized和叠氮化反应与dye-labeled,由铜催化的。染料之间形成共价键结合核苷酸,然后荧光信号通过流式细胞仪测量。(9)特定的增殖细胞群可以可视化的特异性抗体。细胞活力、细胞凋亡和死亡也可以用流式细胞仪使用7-aminoactinomycin D (7-AAD)和膜联蛋白V。

淋巴细胞绝对计数的子集,受到各种生物因素的影响,包括激素、环境、和温度。研究日(生理)淋巴细胞计数的变化显示了进步的CD4 T细胞计数增加一整天,而CD8 T细胞和CD19 + B细胞增加上午8点到中午,中午和下午之间没有改变。自然杀伤(NK)细胞计数,另一方面,是恒定的。昼夜循环t细胞计数的变化已被证明与血浆皮质醇浓度负相关。事实上,皮质醇和儿茶酚胺浓度分布和控制,因此,天真的数量和效应器CD4和CD8 T细胞。人们普遍认为低CD4 t细胞计数在早晨与夜晚相比,在夏季比冬季。因此,这些数据表明,时机,时机和一致性,采血时至关重要的连续监测病人淋巴细胞的子集。

淋巴细胞的生存能力0天:> = 75.0%

最大扩散anti-CD3 % CD45: > = 19.4%

最大扩散anti-CD3 % CD3: > = 20.3%

最大扩散anti-CD3 % CD45 + anti-CD28: > = 37.5%

最大扩散anti-CD3 % CD3 + anti-CD28: > = 44.6%

最大扩散anti-CD3 % CD45 + 2: > = 41.7%

最大扩散anti-CD3 % CD3 + 2: > = 46.2%

测试结果异常anti-CD3 / aCD28 /白介素2(2)表明t细胞功能受损,如果刺激t细胞计数正常或仅略有下降。如果有深刻的T细胞淋巴细胞减少,必须牢记,有“稀释效应”代表名额不足的T细胞在外周血单核细胞(PBMC)人口,可能导致较低的T细胞增殖反应。然而,这不是一个重要的问题在流式细胞仪分析,自收购期间额外的细胞活动分析可以弥补人工增殖减少由于降低t细胞数量。评价t细胞增殖anti-CD3 / - 2可能是有用的在评估患者的t细胞功能耐火材料反应其他促有丝分裂的抗原刺激,特别在IL-2-receptor信号缺陷的背景下,使更大的机械的见解的起源t细胞功能障碍。

解释结果时应该牢记,淋巴细胞增殖反应的范围中观察到健康、免疫主管个人很大。提供的参考范围(基于健康的捐赠者)将有助于确定病人的大小反应。

1。杜邦公司B,好RA:淋巴细胞转换体外免疫缺陷疾病患者:用于诊断,histocompatability测试和监测治疗。出生缺陷源自汽车列车Ser 11:477 1975; 485年

2。石头KD,费尔德曼哈,豪氏威马C, et al:分析体外淋巴细胞增殖的细胞免疫缺陷的筛选工具。中国Immunol 2009; 131:41-49

3所示。Frauwirth KA,汤普森CB:激活和抑制淋巴细胞的聚集有关。中国投资2002;109:295 - 299

4所示。史密斯KA, Gillis年代,贝克PE、et al: T细胞增长factor-mediated T细胞增殖。安纽约科学1979;332:423

5。卡佩尔哒,史密斯KA:白介素2 T细胞系统:一个新的细胞生长模型。科学224:1212 1984;

6。Ledbetter是的,贵族勒,6月CH, et al:刺激T细胞通过CD3 / T细胞受体复杂:胞质钙的作用,蛋白激酶C易位,磷酸化的pp60c-src激活途径。摩尔细胞杂志1987;7 (2):650 - 656

7所示。戴维斯LS, 利普斯基 体育 :T细胞激活anti-CD3抗体需要长时间的刺激诱导的蛋白激酶c细胞Immunol 1989; 118:208 - 221

8。于Y, Arora, Min W, et al: EdU-Click流式细胞术测定代替3 h-thymidine测量人类和小鼠淋巴细胞的增殖。J过敏Immunol 2009; 123 (2): S87

9。撒利族的一个Mitchison TJ: DNA合成的化学方法快速、敏感的检测体内。《美国国家科学院刊105:2415 2008;2420年

10。希克斯MJ,琼斯JK,蒂斯AC, et al:老年性mitogen-induced淋巴细胞的变化函数从出生到老年。是中国分册1983;80:159 - 163吗

11。马弗莱彻,城市RG,就是为了D, et al:淋巴细胞增殖。在临床免疫学实验室手册。第五版。编辑NR玫瑰,EC de Macario JD折叠,等: 华盛顿 直流 。ASM出版社,1997年,页313 - 319

外周血单核细胞RPMI 1640中补充谷酰胺和5%人类AB血清孵化与不同浓度的anti-CD3如果或刺激,anti-CD3 + anti-CD28或anti-CD3 + 2。每天实验正常控制包含在每一批患者样本作为内部控制。

孵化后,细胞增殖和评估沾以下标记:CD45 +淋巴细胞、CD3 + T细胞,细胞CD69 +激活。报告结果为可行的细胞百分比0天,以及总淋巴细胞和T细胞的增殖细胞的比例。(包插入:4、表达载体Click-iT-EdU;未发表的梅奥法)

星期一到星期五

在实验室标本需要收到工作日,周五4点。没有周末处理。

• 授权用户可以登录测试价格费用的详细信息。
• 客户没有测试价格可以联系亚搏一天24小时,一周7天。
• 潜在客户应该联系他们的区域经理。寻求帮助,请联系亚搏。

这个测试被开发使用一种分析物特定的试剂。其性能特征是由梅奥诊所的方式与CLIA要求一致。这个测试没有被清除或得到美国食品和药物管理局的批准。

86353 x 1-Anti-CD3 + anti-CD28刺激

86353 x 1-Anti-CD3 + IL2刺激

86353 x 1-Anti-CD3刺激(显示)

样品报告

正常和异常样本报告作为参考提供报告的外观。

正常的报告|异常报告

如果样品报告

国际体系(SI)的单位报告提供有限数量的测试。这些报告仅用于国际帐户,只可以通过MayoLINK账户已定义接收他们。

如果正常的报告|如果异常报告