支持莱姆病的诊断与血清学的检测
特定的适应症包括测试皮肤活检时皮疹病变不是游走性红斑的特点,和测试滑液或滑膜支持莱姆关节炎的诊断
实时聚合酶链反应(PCR) / DNA探针杂交
通过PCR伯氏疏螺旋体
莱姆病(PCR)
莱姆病,脑脊液
聚合酶链反应
蜱传播的疾病
螺旋体
莱姆病
理智lato集团
包柔氏螺旋体garinii
包柔氏螺旋体afzelii
包柔氏螺旋体mayonii
美国伯氏疏螺旋体lato genogroup
不同
这个试验没有检测到包柔氏螺旋体miyamotoi。如果怀疑感染这种生物,订单BMIYB /包柔氏螺旋体miyamotoi检测PCR、血液或BMIYC /包柔氏螺旋体miyamotoi检测PCR、脊髓液。
标本来源是必需的。
问题ID | 描述 | 答案 |
---|---|---|
SRC71 | 标本来源 |
提交以下标本:只有1
样品类型:脊髓液
容器/管:无菌瓶
样品数量:1毫升
收集产品说明:标签和脊髓液标本。
样品类型:滑液
容器/管:无菌瓶
样品数量:1毫升
收集产品说明:标签和滑液标本。
样品类型:组织(新鲜)
来源:皮肤或滑膜活检
容器/管:无菌容器与生理盐水
样品数量:约4毫米(3)
收集产品说明:
1。只提交新鲜组织。
2。皮肤活组织检查:
活检部位用消毒肥皂清洗。用无菌水彻底冲洗区域。不要使用酒精或碘制剂。可以使用局部麻醉。
b。最好由打孔切片活检标本包括全真皮的厚度。
3所示。标签与源的组织标本。
如果不是电子订购,完成,打印和发送微生物测试请求(T244)标本。
脊髓液,滑液:0.3毫升
组织:NA
所有标本将评估在梅奥诊所实验室测试适用性。yabo208 |
标本类型 | 温度 | 时间 | 特种集装箱 |
---|---|---|---|
不同 | 冷藏(首选) | 7天 | |
冻 | 7天 |
支持莱姆病的诊断与血清学的检测
特定的适应症包括测试皮肤活检时皮疹病变不是游走性红斑的特点,和测试滑液或滑膜支持莱姆关节炎的诊断
莱姆病是多系统和多级tick-transmitted spirochetal细菌造成的感染包柔氏螺旋体burgdorferi理智lato (Bbsl)复杂。(1)几乎所有人类感染是由3 Bbsl物种;B burgdorferi美国这篇(以下称为B burgdorferi)是莱姆病在北美,的主要原因B afzelii和B garinii的主要原因是莱姆病在欧洲吗。在2012年,B mayonii已被确认为莱姆病的不太常见的原因上美国中西部。(2、3)这种生物只在接触患者被发现蜱虫在明尼苏达和威斯康辛州,并在超过10000个标本未发现病人在其他州包括东北地区莱姆病的流行。
莱姆病是最常报道蜱传播的感染在欧洲和北美,导致估计有300000例,每年在美国和欧洲的85000例。(4、5)莱姆病的临床特征是广泛的,可以与各种免疫和炎性疾病混淆。经典呈现早期局部造成莱姆病的迹象B burgdorferi游走性红斑(EM),发生在大约80%的个人。其他早期体征和症状包括不适、头痛、发热、淋巴结病、肌痛。关节炎、神经系统疾病和心脏疾病可能是后期表现。游走性红斑患者中也发现了B mayonii感染,但分散的皮疹是更常见的报道。(2)慢性皮肤病,肢皮炎chronicum atrophicans,也是相关的B afzelii感染。
EM的存在在适当考虑临床诊断为莱姆病和不需要确认实验室检测。在缺乏特色EM病灶,血清学检查是莱姆病的首选诊断方法。(6)然而,血清学可能不积极,直到1到2周后出现症状,可能显示敏感性降低感染的检测B mayonii。因此,使用PCR检测Bbsl DNA可能是一个有用的辅助检测急性疾病的血清学检验。PCR检测表明效用包柔氏螺旋体DNA Lyme-associated皮疹和皮肤活检也被用来检测包柔氏螺旋体DNA滑液和滑膜活检。一般较少,包柔氏螺旋体可以在脑脊液中发现DNA。(7)莱姆PCR应该总是与fda批准的血清学测试执行,结果应该与血清学和流行病学数据和病人的临床表现。(8)梅奥诊所的莱姆PCR试验检测和区分莱姆病在北美的主要原因(B burgdorferi和B mayonii)和欧洲(B afzelii和B garinii)。(7)
负
一个积极的结果表明DNA的存在包柔氏螺旋体burgdorferi,B mayonii,B afzelii,或B garinii,莱姆病的主要代理商。
阴性结果表明没有检测到目标DNA标本。由于临床敏感性PCR试验的局限性,并不排除负面结果的生物或活跃的莱姆病。
血清学测试是莱姆病的诊断建议。PCR可能发挥辅助作用,但可能不检测包柔氏螺旋体burgdorferiDNA脑脊液(CSF)在活跃的情况下或慢性疾病。抑制物质的存在也可能会导致假阴性结果。如果疾病的临床特征是高度代表莱姆螺旋体病,CSF血清学检查是必要的。PCR检测结果应作为辅助诊断和不被认为是诊断。这些结果应该与血清学和流行病学数据和病人的临床表现。
测试患者的脑脊液PCR疑似莱姆螺旋体病应要求患者只有在积极的B burgdorferi血清中抗体免疫印迹试验证实了LYWB /血清莱姆病抗体,免疫印迹和CSF发现异常(高蛋白质和白细胞> 10细胞/大功率字段)。
并发感染多种蜱传播的病原体,包括埃立克体属缪里斯eauclairensis,红孢子虫属phagocytophilum,巴贝西虫microti,和B miyamotoi(回归热包柔氏螺旋体)在美国已报告,应该考虑如果临床表示测试其他病原体。
这个试验检测到的多数成员包柔氏螺旋体burgdorferi理智lato复杂的,包括andersonii B, B美国,和B bissettii,已在人类很少发现。这些生物的DNA的检测报告为一个典型的结果,促使更多的实验室检测进一步识别DNA。这个试验的敏感性检测这些生物还未确定。
这种分析也检测到的一些成员B burgdorferi理智lato (Bbsl)复杂,不认为是人类病原体,但可能会发现蜱虫和其他动物。因此,本试验不应使用测试非人类标本。
下面的验证数据支持使用这个分析临床测试。
分析灵敏度/检测极限(LoD):
较低的LoD大约是300年到1000年基因组拷贝/毫升脑脊液(CSF)、组织、血液和滑液。
精度/诊断敏感性和特异性:
飙升的研究整个有机体的新组织,滑液和脑脊液(上升接近的近似LoD)显示,100%恢复。
分析特异性:
没有PCR信号从提取获得的22个细菌,病毒,寄生虫,和真菌隔离会导致莱姆病症状相似,包括:犬埃立克体属立克次氏体rickettsii R伤寒,巴贝西虫microti,恶性疟原虫,P间日疟原虫,巴尔通氏体属henselae,巴尔通氏体属昆塔纳,单纯疱疹病毒刚地弓形虫。回归热borreliae(包括包柔氏螺旋体miyamotoi也没有发现这个试验。
精度:
国际米兰分析精度为100%和intra-assay精度为100%。
参考范围:
这个试验的参考范围是负的。这个试验只是用于患者临床病史和症状与莱姆一致,并且必须解释在血清学测试的背景下,这是莱姆病的诊断的金标准。这个测试不应该用于屏幕无症状的患者。
可报告范围:
这是一个定性测定,结果报告为有针对性的正面或负面的B burgdorferi,garinii afzelii B, B,或B mayonii。
1。斯坦内克G,蠕虫GP、灰色J, Strle F:莱姆莱姆疏螺旋体病。《柳叶刀》2012;379 (9814):461 - 473
2。普里特BS,米德PS,约翰逊,DK, et al:小说致病性的识别包柔氏螺旋体水平异常高的物种造成莱姆莱姆疏螺旋体病spirochetemia:描述性研究。柳叶刀感染Dis 2016; 16 (5): 556 - 564
3所示。普里特BS, Respicio-Kingry磅,斯隆LM,等:包柔氏螺旋体mayoniisp. 11月的一员包柔氏螺旋体burgdorferi理智lato复杂,在病人和发现蜱虫上美国中西部。Int J系统另一个星球Microbiol 2016; 66 (11): 4878 - 4880
4所示。欣克利房颤,康纳利NP,温顺,et al:莱姆病测试由大型商业实验室在美国。中国感染Dis 2014; 59 (5): 676 - 681
5。林格伦E, Jaenson TGT:莱姆莱姆疏螺旋体病在欧洲:气候和气候变化的影响、流行病学、生态学和适应措施。丹麦哥本哈根:世界卫生组织;2006年
6。疾病控制和预防中心。对测试性能的建议和解释从第二个国家会议上血清莱姆病的诊断。MMWR Morb凡人周代表1995;44 (31):590 - 591
7所示。Babady NE斯隆LM检查者EA, et al:积极的莱姆实时聚合酶链反应速度百分比血液、脑脊液、滑液和组织。成岩作用Microbiol感染Dis 2008; 62 (4): 464 - 466
8。疾病预防控制中心:推荐测试性能和解释。从第二次全国会议莱姆病血清学诊断。MMWR Morb凡人周代表1996;45:481 - 484
从临床标本核酸提取使用自动麦格纳纯LC仪器系统。然后转移到个人提取井96孔板的放大。LightCycler是一个自动化工具,放大和显示器的发展目标核酸扩增子每次循环后PCR。DNA PCR试验的目标是283 - bp plasminogen-binding蛋白基因(OppA2),这是目前在所有频率1副本/生物4确认致病的物种包柔氏螺旋体burgdorferi理智lato genogroup (B burgdorferi美国这篇,B afzelii,B garinii和B mayonii)。一个特定的DNA碱基对目标序列由PCR扩增。扩增子的检测是基于荧光共振能量转移(FRET),利用1与供体荧光团杂交探针,荧光素,3’,第二个杂交探针受体荧光团,LC-Red 610 5的结束。当目标扩增子存在,610年LC-Red发出特定波长可衡量的、可量化的光信号。存在的特定生物核酸可能证实了扩增子的执行一个融化曲线分析。融化的使用特性曲线分析,分析引物和特定杂交探针可以检测和区分B burgdorferi美国的这篇B mayonii,B afzelii,B garinii,虽然不能区分融化曲线分析B afzelii和B garinii。每个试验运行可以在60分钟内完成。(Cockerill FR, Uhl FR:应用程序和实时PCR临床微生物实验室的挑战。在快速实时PCR循环。由U Reischl编辑,C Wittwer, F Cockerill。施普林格,2002年纽约)
6月到11月:周一到周六
12月至5月:星期一到星期五
这个测试开发,其性能特征由梅奥诊所的方式与CLIA要求一致。这个测试没有被清除或得到美国食品和药物管理局的批准。
87476年
87798 x 2
87999(如果适合政府费用)
测试Id | 测试顺序的名字 | 订单LOINC价值 |
---|---|---|
PBORR | 莱姆病PCR | 94253 - 2 |
结果Id | 测试结果的名字 | 结果LOINC值
仅适用于测量结果表示在单位最初报告的执行实验室。并不适用于这些值转换为其他单位的测量结果。
|
---|---|---|
SRC71 | 标本来源 | 31208 - 2 |
23635年 | b . burgdorferi PCR | 94250 - 8 |
38288年 | b . mayonii PCR | 94251 - 6 |
38289年 | B . garinii / B。afzelii PCR | 94252 - 4 |
38323年 | 莱姆CSF评论 | 59464 - 8 |