检测疟原虫DNA和感染物种的识别
辅助传统显微镜Giemsa-stained电影,尤其是在低百分比寄生虫血症或寄生虫形态不佳的情况下
检测和确认的识别疟原虫物种:P恶性,间日疟原虫,P那,malariae,和P诺氏疟原虫
这个测试不应使用屏幕无症状的病人。
看到疟疾实验室检测算法在特殊的指令。
实时聚合酶链反应(PCR) / DNA探针杂交
恶性疟原虫
疟原虫诺氏疟原虫
malariae
疟原虫那
间日疟原虫
看到疟疾实验室检测算法在特殊的指令。
不同
1。这个测试是不在统计的基础上进行,因此,应该不作为主要疟疾的筛检试验。
2。这个测试主要用于确认既定的疟疾感染的诊断和决心疟原虫species-particularly当血液寄生虫形态对传统电影是次优的。
3所示。客户在罗切斯特,MN地区寻求疟疾和主要测试是谁可以提供收集的标本在4小时内应该疟疾发作/快速/巴贝西虫涂片,各不相同。
4所示。实验室无法提供标本收集的4小时内应该执行的初始屏幕疟疾和其他血液寄生虫在发送之前他们的实验室标本梅奥诊所实验室。yabo208
5。这个测试做不包括血涂片检查寄生虫血症/计算。如果计算百分比寄生虫血症也期望为PCR阳性的病例疟原虫物种,客户应该秩序LMALP /疟疾和寄生虫血症PCR反应,各不相同。
血液和幻灯片都是必需的。
样品类型:血
容器/管:薰衣草(EDTA)
样品数量:4毫升
收集产品说明:
2。没有血液转移到其他容器。在原始管发送样品。
样品类型:B洪水的电影
容器/管:干净、舒服的容器在塑料上滑下
样品数量:2薄血电影和2厚血的电影
收集产品说明:
2。准备薄血电影如下:
a。准备一个薄膜的“羽毛边缘”只不过是一个细胞厚。
b。让这部电影彻底风干,然后修复一度沉浸在绝对或95%甲基酒精。
c。允许固定后风干。
3所示。准备厚血电影如下:
大型滴血。(约一个硬币大小的,最好从手指针刺)在一个幻灯片。
b。使用第二张幻灯片的一个角落里,把圆周运动,而应用公司压力下降血液抓到了航母上滑动。这种技术可以让血液快速干燥和遵循的幻灯片。使用约20圆扫描第二张幻灯片。滴血应该完成后大小的四分之一。
c。不解决。之前彻底风干(约45分钟)放置在运输容器中。
如果不是电子订购,完成,打印和发送微生物测试请求(T244)标本。
血:1毫升
幻灯片:看标本。
严重溶血 | 拒绝 |
总脂血 | 拒绝 |
标本类型 | 温度 | 时间 | 特种集装箱 |
---|---|---|---|
不同 | 冷藏(首选) | 7天 | |
环境 | 7天 |
检测疟原虫DNA和感染物种的识别
辅助传统显微镜Giemsa-stained电影,尤其是在低百分比寄生虫血症或寄生虫形态不佳的情况下
检测和确认的识别疟原虫物种:P恶性,间日疟原虫,P那,malariae,和P诺氏疟原虫
这个测试不应使用屏幕无症状的病人。
看到疟疾实验室检测算法在特殊的指令。
疟疾是一种mosquito-transmitted疾病属apicomplexan寄生虫引起的疟原虫。它是全球发病率和死亡率的一个重要原因,与世界卫生组织(世卫组织)估计2.19亿例和435000疟疾有关的死亡人数为2017。疟疾严重影响个人生活在非洲(90%的病例),个人生活在东南亚和东地中海地区影响最大。疟疾流行地区之外也遇到诸如美国,通常在返回的旅行者。
疟疾是主要由4种原生动物引起的疟原虫:P恶性疟原虫,P间日疟原虫,Pmalariae,P那椭圆形。五分之一疟原虫物种,P诺氏疟原虫,猴疟原虫,可能是一个重要的人类感染来源在一些地区的东南亚。区分P恶性疟原虫和P诺氏疟原虫与其他物种因为是很重要的可引起危及生命的感染。此外,P恶性疟原虫通常是耐氯喹等许多常用的抗疟药物。
显微镜Giemsa-stained厚和薄血电影是标准的实验室诊断方法和分化的疟疾寄生虫。在最优条件下,厚膜的敏感性显微镜估计有10到30每微升血液寄生虫。然而,微观诊断需要相当的专业知识和培训不足时可能不敏感或非特异性和设施可用。此外,长时间暴露于EDTA、运输条件,和之前使用抗疟药物可能改变寄生虫形态和执行物种显微镜鉴定的能力产生负面影响。最后,巴贝西虫寄生虫有一个相似的外观P恶性疟原虫环形式(早期营养体)外周血电影,导致潜在的诊断的混乱。
PCR是一种替代方法的疟疾诊断,使敏感和具体的检测疟原虫物种从外周血DNA。PCR可能更敏感比传统显微镜在非常低的寄生虫血症,和更具体的物种鉴定。这可能是特别有用,当主观显微镜不允许某些物种的鉴定。疟疾可以使用PCR结合电影或传统的血巴贝西虫PCR在临床或形态学差异包括巴贝西虫病和疟疾。考试的薄膜还允许计算百分比寄生虫血症,可用于预测预后和监控对治疗的反应。这个测试做不包括寄生虫血症的血液涂片检查或计算。
负
一个积极的结果表明存在疟原虫核酸和融化曲线分析表明感染的物种。
疟疾是一个潜在的威胁生命的疾病,必须尽快测试寄生虫。因此,这个测试只是为了确认除了客户立即罗彻斯特明尼苏达地区可以提供快速交付的梅奥诊所实验室标本。yabo208
分析可能在非常低的寄生虫血症是负的。
种疟原虫出现在混合感染可能不清楚地刻画。
在某些情况下,密切相关的物种,P那和P间日疟原虫,不能区分从一个另一个测试。在这种情况下,结果将报告为“疟原虫间日疟原虫和恶性疟原虫那”。这两个物种有相似的预后和治疗,通常可以区分基于病人旅行史。
这是一个定性的测试。如果需要计算百分比寄生虫血症,订单LMALP /疟疾和寄生虫血症PCR反应,各不相同。
这个试验不区分残余核酸(可能会持续足够的治疗后)和可行的完整的寄生虫。它也不区分配子体(不致病的可能存在的形式解决感染)和毒性营养体。
虽然参考范围被认为是“消极”为个人生活在nonendemic地区,这种试验可能检测出低级的无症状性寄生虫血症从个人暴露于疟疾流行地区。然而,这种分析的目的是检测疟原虫种临床意义,用于患者临床病史和症状符合疟疾。这个测试应该不被用来屏幕无症状的患者。
这PCR试验不检测血液中可能存在的其他寄生虫和疾病报告包括相似巴贝西虫和锥虫属物种。
以下支持使用这对临床试验测定。
精度/诊断敏感性和特异性:
160年临床全血标本进行评估的存在疟原虫18 s rRNA物种DNA或基因使用这种实时PCR分析。试验检测和区分的DNAP恶性疟原虫,间日疟原虫,P那,P malariae,和P诺氏疟原虫。结果与显微镜的结果相比,一个嵌套PCR和测序方法。标本由48 -和108份阳性标本(32P恶性,8Pmalariae,20.P那,45P间日疟原虫,2无法形成物种的形态,和1混合感染P间日疟原虫、恶性疟原虫)。实时的敏感性和特异性疟原虫分析和显微镜相比,嵌套PCR和测序分别是99%和94%,与所有物种所决定的PCR分析匹配最初的结果。没有P诺氏疟原虫临床样本所以飙升研究进行。30 EDTA-anticoagulated血液标本在实验室收到无关的测试飙升了P诺氏疟原虫质粒检测极限附近(50 - 100目标每微升)和测试在盲评-血液标本。100%的飙升的研究也取得了一致性。
下限检测(LoD)的测定是10到50 DNA目标副本每微升全血。
分析特异性:
没有PCR信号从提取获得31其他细菌、病毒、立克次体、和寄生虫隔离,可以发现在全血和引起类似症状,包括包柔氏螺旋体,巴贝西虫红孢子虫属,埃立克体属物种。
精度:
Interassay精度为100%,intra-assay精度为100%。
可报告范围:
这是一个定性分析和报告结果的消极或积极的目标疟原虫物种。
1。Mathison英航,普里特BS:更新关于疟疾诊断和测试的利用率。中国Microbiol。2017年7月,55 (7):2009 - 2017
2。天鹅H,斯隆L, Muyombwe, et al:评价一个实时聚合酶链反应测定诊断疟疾病人来自泰国。是J太Hyg 2005 11月,73(5):850 - 854吗
3所示。世界卫生组织疟疾页面:www.who.int /主题/ / en /疟疾
4所示。cox - singh J,戴维斯T,李K,等:疟原虫诺氏疟原虫疟疾在人类广泛分布并可能危及生命。感染说2008 1月15日,46 (2):165 - 171
提取的DNA EDTA-anticoagulated全血和测试使用实时PCR LightCycler 2.0仪器(罗氏应用科学)与引物和荧光共振能量转移(FRET)调查。genus-specific底漆对应于一组18 s rRNA用于放大目标序列。一对烦恼杂交探针设计恶性疟原虫在一个区域包含碱基对不匹配允许其他的分化疟原虫物种利用融化曲线分析,而第二个探测器设置特定的P诺氏疟原虫(Rosenblatt我Babady NE,斯隆LM,普里特BS:检测疟原虫诺氏疟原虫通过实时聚合酶链反应。地中海是J太Hyg 2009年9月,81(3):516 - 518吗)
周一到周日
这个测试开发,其性能特征由梅奥诊所的方式与CLIA要求一致。这个测试没有被清除或得到美国食品和药物管理局的批准。
87798年
测试Id | 测试顺序的名字 | 订单LOINC价值 |
---|---|---|
LCMAL | 疟疾PCR | 47260 - 5 |
结果Id | 测试结果的名字 | 结果LOINC值
仅适用于测量结果表示在单位最初报告的执行实验室。并不适用于这些值转换为其他单位的测量结果。
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---|---|---|
87860年 | 疟疾PCR | 47260 - 5 |