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革兰氏阴性杆菌纯分离株对碳青霉烯耐药机制的评估
革兰氏阴性杆菌对碳青霉烯类不敏感(肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶)或NDM(新德里金属- β -内酰胺酶)正变得越来越普遍。的基因blaKPC和blaNDM分别编码KPC和NDM酶的产生。除了产生KPC和NDM外,革兰氏阴性杆菌对碳青霉烯类耐药还有其他机制,包括产生其他碳青霉烯类酶,或质粒编码的AmpC,或延长β -内酰胺酶的产生并降低膜通透性。改进的Hodge试验对碳青霉烯酶的检测可能具有主观性,且不快速。测定最低抑菌浓度(MIC)可确定耐药水平,但不能确定耐药机制。PCR是一种灵敏、特异、快速的检测KPC和NDM产生基因的特定部分的方法。
不适用
这种PCR检测并区分两者blaKPC和bla的NDM。积极的KPC (肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶)PCR表明该分离物携带bla原谅。NDM(新德里金属- β -内酰胺酶)PCR阳性表明该分离物携带bla的NDM。
阴性结果表明没有检测到blaKPC或bla的NDM DNA;然而,假阴性结果可能是由于抑制PCR,序列变异的潜在引物,或丢失的质粒携带blaKPC和bla的NDM。
本试验应用于革兰氏阴性杆菌分离株的检测。要求KNSRP / KPC (blaKPC)及NDM (blaNDM)监测PCR,如果需要直接从直肠或直肠周围拭子检测。
使用159株革兰氏阴性芽孢杆菌,包括135株碳青霉烯酶产生菌(105株blaNDM阳性,30blaKPC积极)。该方法对分离株的检测具有100%的灵敏度和特异性,与改进的霍奇试验、检测blaKPC使用KPC (肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶)PCR和检测bla英国伦敦健康保护局(HPA)的NDM by NDM(新德里金属- β -内酰胺酶)PCR。
1.Cunningham SA, Noorie T, Meunier D,等:快速同时检测基因编码肺炎克雷伯菌" (bla和新德里金属- β -内酰胺酶(bla革兰氏阴性杆菌。临床微生物学杂志2013;51:66-69
2.多重实时荧光定量PCR检测肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶(KPC)和新德里金属- β -内酰胺酶(NDM-1)基因。美国疾病控制和预防中心,2011年(未发表)
3.CLSI Document M100-S23, Vol.33 No.1, 2013。CLSI,宾夕法尼亚州韦恩
4.新型耐碳青霉烯肠杆菌促使医疗保健提供商采取额外行动。疾病预防控制中心健康预警网络,2013年2月14日