测试ID: HITIG
肝素pf4 IgG抗体，血清

免疫介导型肝素诱导血小板减少症(HIT-II)、自发型肝素血小板因子4 (PF4) IgG抗体的检测严重急性呼吸综合征冠状病毒2型腺病毒载体疫苗后出现血小板减少和血栓形成

现有和新出现的疾病统称为血小板减少症和血栓综合征;最常见的是肝素诱导血小板减少症(HIT)。新的关联也已被认识到，包括腺病毒载体基础的严重急性呼吸综合征冠状病毒2 (SARS-CoV-2)疫苗诱导的血小板减少和无肝素暴露时发生的HIT样综合征(目前称为自发或自身免疫性HIT)。在这种情况下，肝素血小板因子4 (PF4) IgG抗体通常在手术或感染后产生。

HIT是一种严重的免疫介导综合征(即II型HIT或免疫HIT)，在未分离肝素治疗的患者中发生率为1%至5%，在低分子量肝素治疗的患者中发生率较低。

4Ts评分是一种有效的评估HIT测试前临床概率的评分系统。评分依据血小板减少的发生程度和时间，有无血栓形成(动脉或静脉)，缺乏血小板减少的其他潜在解释。在HIT中，典型的血小板减少发生在肝素治疗的第5天和第10天之间，但血小板减少可能发生得更早(肝素暴露后不到5天即HIT迅速发作)或更晚(肝素暴露后超过4周即HIT延迟发作)。血小板计数通常从基线降低40%到50%或术后高峰(在手术患者),即使绝对计数可能保持正常,血小板减少解决7 - 14天内停止肝素疗法(除非有血小板减少的另一个共存的原因)。(静脉或动脉)血栓形成的发展或进展称为肝素诱导血小板减少合并血栓综合征，可发生在30%至50%的患者中，即使在停用肝素治疗后也很少发生。

血小板减少和血栓形成的其他症状:

越来越多的患者在手术后出现血小板减少和血栓形成的报告，特别是在骨科手术后和选定的感染后。这组患者的临床过程和实验室特征与肝素暴露引起的经典HIT相似，除了可能出现高滴度的抗肝素/PF4复合物抗体。人们逐渐认识到，在接触腺病毒载体SARS-CoV-2 3至4周后出现血小板减少和血栓形成。临床过程也类似于免疫HIT。

哈尔滨工业大学实验室特点:

至少90%的HIT是由对类肝素(肝素或类似的糖胺聚糖)和PF4抗原复合物的抗体引起的。PF4是一种血小板特异性肝素结合蛋白，它在血小板α颗粒中丰富，在血小板刺激后分泌。在正常情况下，PF4在血管内皮细胞上蓄积。肝素给药后，PF4和肝素的免疫原性复合物可以为一些患者的抗体发展提供抗原刺激。显示PF4/肝素抗原复合物的血小板结合抗体可以通过IgG抗体的Fc免疫球蛋白尾部与血小板Fc γ IIa受体的相互作用激活血小板，导致病理过程的持续，在某些情况下可导致富含血小板的血栓形成。

HIT抗体的功能检测依赖于抗体介导的肝素依赖性血小板活化。血小板激活的终点可能是血小板聚集，或血小板分泌5 -羟色胺或三磷酸腺苷，使用患者血清或血浆补充肝素和精心选择的正常供体的血小板。肝素依赖性血小板聚集试验对HIT的敏感性为50% - 60%，血清素释放试验的敏感性为70% - 80%。功能测试阳性诊断HIT的特异性被认为是很高的(>或=90%)。然而，由于其复杂性，用于检测HIT抗体的功能测试尚未广泛应用。

酶联免疫吸附试验(ELISA)可用来检测HIT-II抗体，它是基于检测与肝素和PF4固相抗原复合物(H/PF4复合物)反应的人IgG抗体。ELISA对H/PF4抗体检测非常敏感，但对临床HIT诊断相对非特异性。

目前不推荐在肝素使用之前、期间或之后对所有患者进行常规筛查。ELISA H/PF4阳性对临床HIT-II的发展具有较低且不确定的预测价值。

免疫HIT或HIT样综合征的临床表现:

先前未接触肝素的患者的HIT:

1)血小板计数(血小板减少)较基线或术后峰值下降50%。

2)肝素启动后约5至10天开始出现血小板减少。这可能与肝素治疗患者的新血栓形成或进行性血栓形成有关，也可能与此无关。

先前接触肝素的患者(特别是在100天内):除了上述发现外，血小板减少症可能在再次接触肝素后24 - 48小时内发生。

自发或自身免疫性HIT:

患者通常在手术或病毒感染后一周至10天出现血栓形成(静脉血栓栓塞)或腹痛(提示肾上腺梗死)和血小板减少的症状。

疫苗引起的血小板减少和血栓形成:

患者通常在接种疫苗后4天到4周出现症状。症状可能包括新发的严重头痛(提示脑静脉窦血栓形成)、腹痛(提示肠系膜/门静脉血栓形成)或静脉/动脉血栓栓塞。

ELISA:

< 0.400

解释:

负

结果报告如下:

肝素诱导血小板减少症(HIT)酶联免疫吸附试验(ELISA)光密度(OD)

2)肝素抑制(%)

3)解释。

下表描述了结果和解释的典型模式。如有指示，解释性注释也将随测试报告一起提供。

	打击ELISA OD	肝素抑制	解释
正常范围内	< 0.400	没有完成	负
积极的	>或= 0.400	> = 50%	积极的
模棱两可的	>或= 0.400	< 50%	模棱两可的

人血小板因子4 (H/PF4)抗体检测阴性，对排除临床II型肝素诱导血小板减少症(HIT-II)的预测值约为90%。

由于高达10%的临床HIT患者H/PF4抗体ELISA结果为阴性，所以当临床怀疑程度较高时，H/PF4抗体ELISA结果为阴性并不排除HIT诊断。在这些情况下，HIT抗体的功能检测(如肝素依赖性血小板聚集或血清素释放试验)可能是有用的。请拨打800-533-1710查询订购信息。

阳性提示存在H/PF4复合抗体。然而，根据所研究的患者群体，该检测对HIT临床诊断的特异性低至20%至50%。例如，通过ELISA检测，多达50%的外科患者和多达20%的接受肝素治疗的内科患者可能产生H/PF4抗体，只有一小部分(1%-5%)出现临床HIT。因此，该检测不能证实HIT-II的诊断。诊断必须结合临床表现，包括评估血小板减少的其他潜在原因。

H/PF4抗体的存在可能会增加临床HIT的风险，风险可能部分取决于相关的医疗和外科条件，但目前关于H/PF4抗体阳性的不同人群中HIT的相对风险的数据很少。

肝素诱导血小板减少症(HIT)是一种临床诊断，通过实验室检测人血小板因子4 (H/PF4)复合物抗体和/或功能检测，如血清素释放试验来补充。检测结果提供了H/PF4抗体存在或不存在的信息，这与II型肝素诱导的血小板减少症(HIT-II)的发病机制有关，包括或不包括血栓形成。然而，H/PF4抗体检测结果必须结合临床结果(4T评分)和其他相关测试来评价血小板减少的其他原因(如败血症、血管内凝血和纤溶、血栓性血小板减少性紫癜、输血后紫癜、恶性肿瘤、药物诱导血小板减少、自身免疫性血小板减少症)或证实本试验结果。

一些低滴度、低亲和性的抗体和一些识别H/PF4复合物位点的抗体可能无法检测到。

一些患者可能自然产生肝素血小板因子4抗体(没有肝素依赖的证据)，对HIT-II的发病机制没有已知的意义。

将208例患者的IgG人血小板因子4 (H/PF4)酶联免疫吸附试验(ELISA)与IgGAM H/PF4酶联免疫吸附试验(GTI Immucor)和肝素依赖性血小板血清素释放试验(SRA) (Quest Diagnostics和Wisconsin Blood Center)进行比较。假设SRA为金标准，对数据进行分析，以确定ELISA方法对阳性SRA的敏感性。在接受检测的208例患者中，49例SRA阳性。IgGAM H/PF4 ELISA检测47/49阳性(敏感性96%);IgG H/PF4 ELISA检测45例阳性，敏感性92%。SRA阴性者159例，IgGAM H/PF4 ELISA阳性者67例(42%)，IgG H/PF4 ELISA阳性者37例(23%)。(梅奥验证数据)

为了确定靶抗原和肝素相关抗体以外的抗体之间可能的交叉反应，68个样本含有各种抗体，包括已知的血小板同种抗原抗体、血小板自身抗体、本实验检测了HLA I类抗体和抗类风湿因子抗体，未发现与固定在微孔中的靶抗原发生交叉反应。

1.对于肝素诱导的血小板减少症，igg特异性与多特异性酶联免疫检测的诊断准确性:一项系统综述和荟萃分析。J Thromb haememost 2017 6;15(6): 1203-1212

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