网络: | mayocliniclabs.com |
---|---|
电子邮件: | mcl@mayo.edu |
电话: | 800-533-1710 |
国际: | + 1 855-379-3115 |
值仅在打印当天有效。 |
病毒核酸由MagNA Pure自动化仪器(罗氏应用科学)从临床标本中提取。引物指向目标Us9(1) LightCycler仪器在PCR循环过程中的退火步骤后,通过荧光对目标核酸序列的发展进行扩增和监测。这是一个自动PCR系统,可以快速检测扩增子的发展,通过严格的空气控制温度循环毛细管试管。扩增产物的检测是基于荧光共振能量转移(FRET)原理。对于FRET产物检测,外部光源激发带有3'端供体荧光团(荧光素)的杂交探针,并发出光,该光被位于5'端带有受体荧光团(LC-Red 640)的第二个杂交探针吸收。受体荧光团然后发出不同波长的光,可以用与特定PCR产物的数量成比例的信号来测量。PCR扩增后进行熔化曲线分析。从45摄氏度开始,热室的温度慢慢提高到80摄氏度,并在频繁的间隔中测量荧光。利用LightCycler软件完成PCR扩增和探针熔化曲线分析。(Espy M, Binnicker MJ:临床标本中巨细胞病毒定性检测的6种实时PCR方法的比较。J clinical Microbiol 2013:51[11]:3749-3752
周一到周日