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免疫球蛋白A:
总IgA水平由免疫比浊法测定。将能识别人类IgA的兔抗血清添加到患者样本中。人IgA和兔免疫球蛋白之间形成免疫复合物;免疫复合物散射穿过样本的光。散射光的强度与样品中人类IgA的含量有关。样品中IgA的浓度由多点校准曲线计算得出。使用手册:贝林浊度计II操作。戴德贝林公司。纽瓦克,19714。2008)
组织转谷氨酰胺酶(tTG)抗体IgA/IgG:
采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测tTG的IgA和IgG抗体。重组人tTG抗原表达于大肠杆菌在保持抗原天然状态的条件下,被吸附到微滴定板的孔中。在允许抗体与tTG抗原结合的条件下,将稀释的患者血清加入微量滴度板孔。将未结合的样品成分冲洗掉,并将辣根过氧化物酶(HRP)标记的抗人IgA或IgG抗体结合物添加到每孔中。第二次孵育后,去除未结合的酶标,加入四甲基联苯胺(TMB)显色底物检测结合物。最后孵育后,用分光光度法测定着色产物;将病人样本的吸光度与阳性校正器进行比较。吸光度与IgA或IgG对tTG的抗体水平成正比,tTG以任意单位表示。使用说明书:QUANTA Lite R h-tTG IgA和IgG。Inova诊断公司。加州圣地亚哥,92131。启7,1/2015)
麦胶蛋白(脱酰胺)抗体IgA/IgG:
采用ELISA法检测抗脱酰胺醇溶蛋白肽IgA和IgG抗体。纯化的多肽在保留抗原的天然状态的条件下被吸附到微量滴定板的孔中。稀释后的患者血清加入微量滴度板孔,使抗体与脱酰胺的麦胶蛋白肽结合。将未结合的样品成分冲洗掉,并将hrp标记的抗人IgA或IgG抗体结合物添加到每孔中。第二次孵育后,去除未结合的酶标,加入TMB显色底物检测结合物。最后孵育后,用分光光度法测定着色产物;将病人样本的吸光度与阳性校正器进行比较。吸光度与脱酰胺醇溶蛋白肽的IgA或IgG抗体水平成正比,它们以任意单位表达。(使用手册:QUANTA Lite Gliadin IgA II和IgG II。INOVA诊断公司。加州圣地亚哥,92131。 rev. 1, 4/2015)
肌内膜(EMA)抗体,IgA:
采用间接免疫荧光法检测IgA肌内抗体。将恒河猴食道底物冰冻切片覆以稀释的患者血清并孵育。洗涤后,玻片覆盖荧光素偶联IgA抗血清并孵育。最后一次冲洗后,用荧光显微镜对载玻片进行分析。IgA抗肌内膜抗体:疱疹样皮炎和腹腔疾病的一种新的免疫学标志物。Br J Dermatol 1984;111:395-402)