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测试ID: IABCS
免疫缺陷和免疫能力评估的b细胞表型分析,血液

方法描述描述如何执行测试,并提供特定于方法的参考

淋巴细胞亚群:T, B, NK:

T、B和自然杀伤(NK)细胞表面标记试验使用单克隆抗体来识别各种膜抗原,并用流式细胞术计数表达这些分化抗原的细胞数量。CD14用于排除单核细胞,从而提高淋巴细胞群的准确性和纯度。报告的结果是每毫升血液中淋巴细胞总T细胞(CD3+)、CD3+CD4+ T细胞、CD3+CD8+ T细胞、自然杀伤细胞(CD16+56+、CD3-)和b淋巴细胞(CD19+)的百分比,以及每种细胞类型的绝对数量。该分析是一个七色免洗程序和绝对计数是从内部珠标准计算。此外,还报道了总淋巴细胞计数和CD4:CD8比值。(Hoffman RA, Kung PC, Hansen WP, Goedstien G:外周血中人类T淋巴细胞及其亚类的简单和快速测量。中国科学院院刊,1980:77:4914-4917;美国卫生与公众服务部:人类免疫缺陷病毒感染患者CD4+ t细胞检测的指导方针MMWR Morb Mortal Wkly Rep, 1997年;RR-2页1至29)。

B细胞亚群,血液:

使用Ficoll梯度从全血中分离外周血单个核细胞(PBMC),并用于染色方案。该检测包括多色5管面板,用于检测以下抗体:CD45、CD19、CD20、CD27、IgD、IgM、CD38和CD21。特异性抗体染色后,用多聚甲醛清洗并固定细胞,然后在Becton Dickinson FACS Canto仪上进行流式细胞仪分析。细胞表面的表达被表示为CD19+ B细胞表达每一种特定标记物的百分比。CD19+和CD20+ B细胞以淋巴细胞总数(CD45+)的百分比表达。b细胞亚群的绝对计数来自全血的流式细胞术分析,使用单克隆抗体识别CD45、CD3、CD4、CD8、CD19和CD16+CD56+。CD14用于排除单核细胞,从而提高淋巴细胞群的准确性和纯度。该分析是一个7色,溶解-不洗涤程序和绝对计数是从内部珠标准计算。每微升绝对淋巴细胞计数用于计算本试验中各种b细胞亚群的绝对计数(未发表的Mayo方法)。

常见可变免疫缺陷确认流程

外周血单个核细胞被分离并用CD19、跨膜激活剂、钙调剂和亲环素配体(CAML)相互作用剂(TACI)和b细胞激活因子受体(baffr)进行染色,每一个都与荧光色素结合。用特异性抗体染色后,清洗细胞,用多聚甲醛固定,然后在Becton Dickinson FACS Canto仪上进行流式细胞仪分析。细胞表面表达量为CD19+ B细胞表达TACI和baffr的百分数。(未发表的梅奥法)

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没有

天(s)列出进行测试的天数。这一范围反映了样品必须在测试实验室开始测试过程的日期,包括测试执行前的任何样品准备和处理时间。有些检测被列为连续进行的,这意味着在一天中进行多次检测。

星期一到星期五

报告可用时间间隔(从梅奥诊所实验室收到样本到获得结果)考虑到标准设置日和周末。yabo208第一天通常是结果可用的时间。最后一天是可能需要的时间,包括任何必要的重复测试。

3 - 4天

样品保留时间概述测试后标本在实验室中保存的时间,然后将其丢弃

PBMC可在-70℃下保存7天

执行实验室的位置指示执行测试的实验室的位置

罗彻斯特