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对标本进行细胞计数,以建立镀层体积。根据细胞计数,将相应体积的骨髓加入2个盛有培养基的培养瓶中进行培养。在收获过程中,细胞暴露在秋水仙素和低渗溶液中,然后固定。中期细胞滴在玻片上,g显带染色。必要时可采用其他染色方法。通常检查20个中期。如果怀疑是克隆,但在20个中期未被证实,则将分析30个中期。异常克隆存在的最小证据被定义为2个或更多的中期具有相同的结构异常或染色体增加(三体),或3个或更多的中期缺乏同一染色体。所有被分析的细胞都被计算机成像系统捕获,每个克隆的一个或多个核图被准备好来记录异常的类型,并允许系统地解释异常。
如果患者年龄在30岁以上,且有慢性淋巴细胞白血病(CLL)、小淋巴细胞淋巴瘤(SLL)、淋巴细胞增多症或Waldenstrom巨球蛋白血症的检测理由,则将添加cpg刺激培养,并额外分析10个细胞。如果有必要,可以从未受刺激或cpg刺激的细胞培养中分析额外的中期,以提供准确的解释。使用计算机成像系统捕获所有中期,并准备从每个克隆的一个或多个核图来记录异常的类型,并允许系统地解释异常。(未发表的梅奥法)
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