网络: | mayocliniclabs.com |
---|---|
电子邮件: | mcl@mayo.edu |
电话: | 800-533-1710 |
国际: | + 1 855-379-3115 |
值仅在打印当天有效。 |
等电聚焦用于分解半乳糖-1-磷酸尿苷转移酶(GALT)的同工酶。条带模式,当与定量GALT结果结合使用时,可以用来预测个体的GALT表型。
在等电聚焦中,通过向琼脂糖凝胶中加入选择性两性分子混合物并对凝胶施加电场,可以在琼脂糖凝胶上建立pH梯度。每一种蛋白质(同工酶)都有自己独特的等电点,即蛋白质的净电荷等于零的pH值。因此,如果一个蛋白质被应用到凝胶上,它将通过凝胶中的pH梯度迁移,直到它达到其等电点。在那里,蛋白质会停止并“聚焦”成不同的条带。
在这个过程中,红细胞溶血液集中在含有pH值5到7范围两性电解质的5%琼脂糖凝胶上。然后通过应用底物混合物使同工酶带可视化,从而产生一系列反应(如下所示)。最终产物是还原的烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH),当它与吩嗪甲氧基硫酸盐和3-(4-5二甲基噻唑-2-基)i -2,5-二苯四唑溴化反应时呈蓝紫色。半乳糖焦磷酸化酶和半乳糖-1-磷酸尿苷转移酶的琼脂糖凝胶等电聚焦:udp -半乳糖焦磷酸化酶发育方面的研究。用商品化试剂测定血清中异淀粉酶的电泳。化学1982;28:37-40;陈志强,陈志强:先天性代谢异常的实验室研究。In: Sarafoglou K, Hoffman GF, Roth KS, eds。《儿科内分泌学与先天性代谢错误》(第二版);2017:1139 - 1158)。
高尔特 |
||
Gal-1-P + UDP-Glu |
-------------> |
UDP-Gal + Glu-1-P |
Phosphoglucomutase |
||
胶-1- p +胶-1-6 diP |
-------------> |
胶-1-6 diP +胶-6- p |
Glu-6-P-Dehydrogenase |
||
Glu-6-P +辅酶ii |
-------------> |
核糖-5- p + CO2 + NADPH |
Nadph + MTT + PMS |
-------------> |
蓝紫染色 |
周四