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血红蛋白电泳:
毛细管系统是一种自动化系统,使用毛细管电泳通过其在碱性缓冲液中的电泳迁移率分离带电分子。根据电解质pH和电渗流发生分离。通过抽吸注射用溶血溶液进行样品稀释。发生高压蛋白质分离,直接检测血红蛋白蛋白质级分是415nm,其特异于血红蛋白。得到了所得电光峰峰进行图案异常,并被定量为存在的总血红蛋白的百分比。通常发现血红蛋白级分的位置的实例由阴极到阳极:Hb A2',C,A2 / O阿拉伯,E,S,D,G-Philadelphia,F,A,Hope,Bart,J,N-BALTIMORE和H.(Louahabi A,Philippe M等):评估新的Sebia试剂盒,用于分析毛细血管系统上的血红蛋白分数和变体。Clin Chem Lab Med。2006; 44 [3]:340-345;使用说明书:毛细血管血红蛋白(E)使用毛细血管2柔性刺穿仪器。Sebia; 06/2014)
高效液相色谱 :
使用高效液相色谱(HPLC)将全血的溶血液通过阳离子交换柱注入分析流。预编程梯度控制洗脱缓冲液混合物,也通过分析盒。通过增加第二缓冲液的百分比来提高洗脱缓冲液的离子强度。随着缓冲液离子强度的增加,从滤筒中流出的血红蛋白保留得更强。用双波长滤光片光度计检测吸光度的变化。吸光度的变化可以用吸光度随时间的色谱图来显示。Huismann TH, Scroeder WA, Brodie AN等:血红蛋白的微色谱仪。3测定血红蛋白A2的简易程序。临床医学杂志1975;86:700-702; Ou CN, Buffone GJ, Reimer GL, Alpert AJ: High-performance liquid chromatography of human hemoglobins on a new cation exchanger. J Chromatogr. 1983;266:197-205; instruction manual: Bio-Rad Variant II Beta-thalassemia Short Program Instructions for Use, L70203705. Bio-Rad Laboratories, Inc; 11/2011)
氧解离,P50:
血氧分析仪的操作原理基于双波长分光光度法,用于测量血红蛋白(以百分比)和克拉克电极的氧饱和度,用于测量汞毫米的氧气分压。来自两个测量系统的所得输出信号被送入计算机并分析。(Guarnone R,Centenara E,Barosi G:血氧分析仪的性能特征,用于评估血红蛋白解离曲线。血液中的。1995; 80:426-430;Vanhille DL,Nussenzveig Rh,Glezos C,Perkins S,Agarwal Am。临床实验室中使用Hemox分析仪的最佳实践:质量控制测定和抗凝血剂的选择。实验室血红糖。2012年9月(3):17-9。DOI:10.1532 / LH96.12001)
质谱分析血红蛋白变异
使用四极 - 飞行时间MS(Q-TOF-MS)进行质谱(MS),并用安捷伦Masshunter软件分析结果。通过离心除去全血1:50,用纯净的水和细胞碎片稀释。然后将上清液用运行缓冲液(1:1水:乙腈,1%甲酸)稀释1:10,并使用流动注射在MS模式下在Q-TOF MS上进行分析。每个变型的计算质量已集成到包含多种方法测量的历史数据的数据库中,并且经验证据MS质量峰被用作搜索标准。(Zanella-Cleon I,Joly P,Becchi M,Francina A:表型血吸虫病的测定通过质谱。Clin Biochem。2009; 42 [18]:1807-1817; Helmich F,Van Dongen JL,Kuijper ph,Scharnhorst V,Brunsveld L,Bruneren Ma。通过完整蛋白质的高分辨率质谱快速表型血红蛋白筛选。Clin Chim Acta。2016年9月1日; 460:220-6。DOI:10.1016 / J.CCA.2016.07.006)
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